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噬菌體計(jì)數(shù)
噬菌體的效價(jià)是指1ml培養(yǎng)液中含侵染性的噬菌體粒子數(shù)。一般一個(gè)噬菌體形成一個(gè)噬菌斑，故可根據(jù)一定體積的噬菌體培養(yǎng)液所出現(xiàn)的噬菌斑形成單位（plaque-forming unit ，PFU），計(jì)算出噬菌體的效價(jià)。數(shù).JPG)
噬菌斑（Plaque）：將少量噬菌體與大量宿主細(xì)胞混合后，將此混合液與45℃左右的瓊脂培養(yǎng)基在培養(yǎng)皿中充分混勻，鋪平后培養(yǎng)。當(dāng)一個(gè)噬菌體侵染一個(gè)敏感細(xì)胞后，不久即釋放出一群子代噬菌體，它們通過(guò)瓊脂層的擴(kuò)散又侵染周圍的宿主細(xì)胞，并又引起它們裂解，如此經(jīng)過(guò)多次重復(fù)經(jīng)數(shù)小時(shí)至10余小時(shí)后，在平板表面布滿宿主細(xì)胞的菌苔上，肉眼就可看到的一個(gè)個(gè)透亮不長(zhǎng)菌的小圓斑，這就是噬菌斑。
由此可見(jiàn)，噬菌斑的形成與細(xì)菌菌落的形成有點(diǎn)相似，所不同的只是噬菌斑甚像一個(gè)“負(fù)菌落”。迅數(shù)全自動(dòng)菌落分析儀可應(yīng)用于噬菌斑平板計(jì)數(shù)的自動(dòng)化。 |
