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微生物限度檢查

    微生物限度檢查法是指檢查非規(guī)定滅菌制劑及其原料、輔料受微生物污染程度的方法。檢查項目包括細菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)及控制菌檢查。檢查法有平皿法和濾膜法,都可借助全自動菌落分析儀實現(xiàn)菌落自動計數(shù)。  
   
微生物限度檢查法應在環(huán)境潔凈度10000級下的局部潔凈度100 級的單向流空氣區(qū)域內進行。檢驗全過程必須嚴格遵守無菌操作,防止再污染。單向流空氣區(qū)域、工作臺面及環(huán)境應定期按《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室( 區(qū) )懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》的現(xiàn)行國家標準進行潔凈度驗證。
  
   
供試品檢查時,如果使用了表面活性劑、中和劑或滅活劑,應證明其有效性及對微生物的生長和存活無影響。除另有規(guī)定外,本檢查法中細菌培養(yǎng)溫度為 30 35℃ ;霉菌、酵母菌培養(yǎng)溫度為 23 28‘C ;控制菌培養(yǎng)溫度為35 37℃ 。檢驗結果以 1g 1m1 、 10g 10ml 10cm 為單位報告。
  
   
細菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌數(shù)檢查法:
   
   
平皿法:取均勻供試液,用 pH7.0 氯化鈉 - 蛋白胨緩沖液稀釋成 1 ∶ 102 、 1 ∶ 103 等稀釋級,取適宜的連續(xù) 2 3 個稀釋級的供試液進行菌數(shù)測定。 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基用于細菌計數(shù),玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基用于霉菌計數(shù)。在特殊情況下,前者同時點計霉菌、酵母菌菌落數(shù),后者同時點計細菌菌落數(shù)。酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基用于酵母菌計數(shù)。合劑用玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基與酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基分別測定霉菌、酵母菌菌落數(shù),合并計數(shù)。液體制劑用玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基同時點計霉菌菌落數(shù)及酵母菌菌落數(shù)。
  
   
過濾法: 應采用開放式薄膜過濾法,濾膜的孔徑不大于 0.45 μm。選擇濾膜材質時應考慮供試品及其溶劑的特性。培養(yǎng)和計數(shù)同平皿法,每片濾膜上的菌落數(shù)應不多于 100 個。



 




 

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